Иммуноглобулин Е и IGE-опосредованная реакция при атопических заболеваниях


Хотя классические аллергические заболевания - бронхиальная астма и аллергический ринит - известны с древних времен, летальный анализ этих состояний был проведен лишь в начале нынешнего столетия. Первое сообщение о переносе сывороточного фактора датировано 1919 г. Ramirez описал больного, страдавшего пернициозной анемией, которому провели переливание крови. Донором был другой больной - с аллергией к компоненту эпидермиса лошади. Эту процедуру реципиент перенес благополучно, однако через несколько дней у него развился приступ астмы, как если бы он сам находился в контакте с аллергеном.

Еще более широкую известность получили исследования Ргаusnitz и Kustner. Kustner страдал аллергией к рыбным продуктам и реагировал даже на самые незначительные их порции (тошнота, рвота, крапивница, астма). Prausnitz решил провести смелый эксперимент. Он сделал себе инъекции в несколько точек кожи живота (по 0,1 мл) следующих растворов: 1 - сыворотки Кюстнера (неразведенной и в разных концентрациях), 2- сыворотки человека, не страдавшего аллергическими заболеваниями, 3 - изотонического раствора NaCl. На следующий день на эти участки и на области интактной кожи он сделал аппликации по 0,1 мл разведенного рыбного экстракта. В тех местах, куда предварительно была введена сыворотка Кюстнера, появились классические волдыри с зоной гиперемии. Так впервые удалось осуществить перенос аллергии человеку в условиях эксперимента. Одновременно исследователи показали, что сыворотка больного аллергией не содержит преципитинов, не связывает комплемент, а также не обладает какой-либо другой активностью антител. Поскольку эти антитела отличались от тех, которые были известны до сих пор, Coca и Grove предложили термин «реагин».

Связь между активностью реагина и IgE. Были проведены многочисленные опыты в целях определения активности реагина к одному из известных классов Ig. Долгие годы эти попытки приводили к противоречивым результатам. Первоначально реагины принимали за IgG, однако точные методы идентификации показали, что они имеют сходство скорее с IgA. Только Ishizaka и соавт., а также Johansson и соавт. доказали, что реагины относятся к IgE.

При детальном исследовании значительного количества реагинсодержащих сывороток (аллергены: пыльца, перхоть животных, домашняя пыль, пенициллин) с помощью реакции преципитации было доказано, что в каждом конкретном случае происходит полное связывание активности реагина со специфической сывороткой анти-IgE. При фракционировании реагинсодержащих сывороток оказалось, что концентрация IgE и активность реагина (титрование по Прауснитцу-Кюстиеру) находятся в прямой зависимости. С помощью специальных экспериментов можно получить преципитат, который при титре реагина 1:80 000 не содержит иммуноглобулинов другого класса. Сходные результаты были получены в опытах с иммуносорбентами (например, при использовании глутарового альдегида можно перевести сыворотку анти-IgE в нерастворимое состояние).

Johansson и соавт. сообщили о случае миеломной болезни, при которой миеломный белок нельзя было отнести ни к одному из известных классов Ig. По этой причине неидентифицированный белок обозначили IgND (по инициалам больного миеломой). Несколько позже было установлено, что IgE, открытый Ishizaka, и IgND, описанный Johansson, идентичны по структуре. По инициативе ВОЗ утверждено единое обозначение - IgE.

Химические свойства. IgE - это гликопротеид с коэффициентом седиментации 8,2. При электрофорезе он мигрирует в зону быстрых или медленных фракций. Он не осаждается с помощью 30% раствора сульфата аммония. Отличительная особенность молекулы IgE заключается в том, что она содержит два соединяющих тяжелые цепи дисульфидных мостика, между которыми находится целый домен (1-й мостик расположен между Се1- и Се2-доменами, 2-й -между Се2 и Се3). Кроме того, дополнительная дисульфидная связь обнаружена между аминокислотами 139 и 225 в области СЕ1-домена. Об относительно высоком содержании углеводов (11,4-11,7%) можно судить на основании наличия 6 олигосахаридных цепей.

Свойства реагинов зависят от рН раствора: при рН более 6-11 реагины оказываются нестабильными. Важен и температурный режим: при нагревании до 56°С они теряют способность к связыванию на клетках. По сравнению с IgG молекула IgE инактивируется после обработки 0,1 М раствором меркаптоэтанола, вероятно, в результате расщепления и последующей редукции. Это прежде всего оказывает влияние на связывание с антигеном, в то время как способность фиксации на клетках в целом не изменяется. При обработке папаином IgE более устойчив, чем IgG.

Иммунологические свойства. Детальный анализ IgE выявил стабильную и лабильную детерминанты, которые были обозначены как D81 и De2. Для определения IgE в качестве антигена используют главным образом антисыворотки к стабильной Del-детерминанте. Субклассы цепей до сих пор не идентифицированы с достаточной точностью. Исследования показали, что IgE человека по своим свойствам аналогичен IgE обезьяны, собаки и крысы.

IgE или реагины, - это биологически высокоактивные антитела. Они вызывают опасные для организма реакции, а также реагируют с соответствующими аллергенами -in vitro. С помощью иммуносорбентов (например, нагруженные аллергеном эритроциты, частицы полистирена или целлюлозы, а также нерастворимый агрегат аллергена) можно полностью удалить из сыворотки активность, ответственную за кожные проявления при сенсибилизации. На этом принципе основаны методы выявления IgE.

Структура IgE представлена двумя Н- и двумя L-цепями, что подтверждает бивалентность антител, как и тот факт, что IgE в достаточной концентрации могут агглютинировать нагруженные антигеном сенсибилизированные эритроциты. Эта гемагглютинирующая активность сопоставима с таковой IgE. Реагины не проникают через плаценту, поэтому новорожденный ребенок, чья мать страдает аллергией, не сенсибилизирован. IgE не проходит также через гематоэнцефалический барьер.

Внутрикожная аппликация сыворотки анти-IgE (например, кроличьей) может вызвать у здорового человека характерную реакцию в виде крапивницы. Это подтверждает, что даже при низких концентрациях IgE обладает достаточно выраженной аффинностью, необходимой для связывания на клетках. Кроме того, аппликация специфической сыворотки может вызвать обратимую местную реакцию анафилаксии. Аппликация 1000-кратных объемов антисывороток против IgG, IgM, IgA или IgD, как правило, не обусловливает реакций. В серии опытов было показано, что из лейкоцитов лиц, страдающих атопическими заболеваниями, а также здоровых пассивно сенсибилизированных, при добавлении анти-IgE и соответствующего аллергена высвобождается гистамин. С помощью довольно чувствительных методов удалось доказать, что в незначительном объеме (1% от IgE-молекул) IgG также связывается на поверхности тучных клеток; поэтому не исключено, что IgG участвует в «атопической реакции».

Связывание реагина на клетках - это его отличительное свойство. Структуры, ответственные за этот процесс, локализованы в доменах СE3 или СE4. Первичный участок связывания находится в СЕ4. Он контактирует с мембранным рецептором тучной клетки или базофильного гранулоцита. Участок вторичного связывания расположен в СЕ3 или СЕ4 (связывание других участков этих доменов с неспецифическими структурами мембран). Относительно новые данные свидетельствуют о том, что решающим моментом для связывания на рецепторах является не столько последовательность, сколько конформация структур. Этим объясняется значение SS-связей. Низкоаффинные рецепторы были обнаружены на различных клетках.

Тучные клетки и базофилы. Клеточный рецептор - это комплекс, состоящий из двух субъединиц.

Альфа-комплекс расположен на поверхности и действует непосредственно как рецептор. Бета-комплекс, по-видимому, служит для переноса рецепторного эффекта - фактор связывания. Далее в процессе переноса принимают участие протеины, обладающие регуляторными и каталитическими свойствами. По всей вероятности, особое значение имеет нейраминовая кислота. IgE довольно прочно фиксируется на мембране; этот факт может объяснить относительно высокую константу связывания.

Связывание IgE на клетках - это зависимый от времени процесс. Оптимальная сенсибилизация может наступить примерно через 50 ч, но при высоком титре антител аллергическая реакция клеточного типа развивается в более ранние сроки. Антитела, фиксированные на клетках, долгое время остаются связанными, поэтому аллергическая реакция может быть вызвана спустя неделю. При местной аппликации IgEs период полураспада составляет 9-14 дней. IgE - это высокоаффинные антитела, что подтверждается следующим фактом: введенный внутривенно реагин быстро выводится из циркуляции. Указанный процесс связывания возможен только внутри одного вида или между близкими в филогенетическом отношении видами (человек и обезьяна). Тем не менее относительно недавно появилось сообщение о том, что с помощью иммунофлюоресцентной антисыворотки было продемонстрировано слабое связывание реагина на тучных клетках крысы.

В экспериментах на изолированных тканях и клетках выявлена определенная температурная зависимость. Так, скорость пассивной сенсибилизации лейкоцитов человека увеличивалась в 12 раз при повышении температуры с 4 до 37 °С. Отдельные данные указывают на двухэтапность процесса. При сенсибилизации мечеными антителами было показано, что феномен связывания на клетках и сенсибилизация не идентичны.

Для проявления аллергической реакции особую роль играет связывание на тучных клетках и базофилах.

Определенный интерес представляют исследования, проведенные в эндемичных районах Африки (паразитарные инфекции). Атопические заболевания встречаются там крайне редко. Чем выше была концентрация сывороточного IgE, тем реже регистрировали случаи данных заболеваний - это, вероятно, следует рассматривать как показатель конкуренции при ограниченном количестве клеточных рецепторов.

Для максимального проявления феномена высвобождения гистамина с помощью антисыворотки против IgE, по-видимому, достаточно около 4000 молекул IgE на клетку. Обращает на себя внимание тот факт, что ни клеточная чувствительность, ни клеточная реактивность (максимум высвобожденного гистамина) не зависят от количества молекул IgE. Эти реакции могли бы служить также для оценки неспецифических биохимических механизмов.

Молекулы IgE могут связываться диффузно, в виде пятна, в форме полярной «шапочки», а также присутствовать в вакуолях (пиноцитоз). Топографическое расположение не бывает постоянным и зависит от таких факторов, как температура, доза и время. Реакция высвобождения гистамина наиболее выражена при диффузном расположении молекул IgE, в то время как при образовании «шапочки» активность этого процесса несколько снижена.

Связывание IgE на других клетках. Fc-рецепторы с проявлением менее выраженного аффинитета обнаруживают на разных видах клеток.

Читать далее Реакция аллергена с IgE-антителами и ее влияние на базофилы



Ваше имя:
Защита от автоматических сообщений:
Защита от автоматических сообщений Символы на картинке: