Вакцина против клещевого энцефалита
Эта вакцина относится к числу убитых вирусных вакцин, так как изготовляется на основе инактивированных формалином вирулентных штаммов вируса клещевого энцефалита, выращенных во взвешенной культуре клеток куриных эмбрионов. Для производства вакцины используют хорошо изученные штаммы с определенной антигенной структурой, которые в основном и циркулируют в пределах природных очагов клещевого энцефалита, выделяясь из организма естественных хозяев - источников инфекции и от заболевших людей. При этом в качестве производственного избирают такой штамм, который хорошо размножается в культуре клеток куриного эмбриона и регулярно дает большой выход антигенного материала после инактивации формалином.
Маточные культуры производственного штамма хранятся в виде мозговой ткани зараженных белых мышей, которую сохраняют в глицерине при -20°С. Суспензия мозга белых мышей, зараженных вирусом 3-го пассажа, используется для производства вакцины.
Вначале подготавливают взвешенную культуру клеток, для чего отбирают полученных из специального хозяйства жизнеспособных куриных эмбрионов 9-10-дневного возраста, извлекают их из яиц и по 50- 55 измельченных тушек обрабатывают 1% раствором трипсина Дифко при 32°С. После центрифугирования со скоростью 500-700 об/мин взвесь клеток (осадок) сливают в бутыли, ресуспендируют в среде № 199 с добавлением гидролизата лактальбумина и бычьей сыворотки.
Затем взвесь клеток заражают подготовленной мозговой суспензией вируса. Зараженные клетки инкубируют при 37°С в течение 48-68 ч и определяют концентрацию вируса. Если титр вируса в вируссодержащей жидкости не меньше 107 LD в 1 мл, в бутыль добавляют формалин до конечной его концентрации 1:2000 и выдерживают ее 10 дней при 12-14°С, интенсивно перемешивая содержимое 2-3 раза в день по 3-5 мин.
После завершения инактивации и контроля на безопасность культуральную жидкость фильтруют и сорбируют гидроокисью алюминия, который добавляют в количестве 1-2 мг на 1 мл. Готовый препарат разливают по 5-10 мл в ампулы.
В процессе контроля вакцины исследуют:
- физические свойства (жидкая вакцина должна иметь вид гомогенного раствора розового цвета без осадка, хлопьев и посторонних включений и опалесцировать вследствие наличия сорбента);
- стерильность (посевы на разные питательные среды должны оставаться стерильными);
- иммуногенность;
- антигенность;
- безвредность.
Если результаты контрольных исследований соответствуют перечисленным требованиям, вакцину передают для прививок против клещевого энцефалита.
Срок годности жидкой вакцины 2 года при условии правильной транспортировки и хранения препарата в сухом темном месте при 4-10°С.
Применяют вакцину для вакцинации и последующей ежегодной ревакцинации детей и взрослых в возрасте от 4 до 70 лет, подверженных нападению клещей, в пределах природных очагов клещевого энцефалита.
Разовая прививочная доза для детей 4-7 лет 0,5 мл, а для детей старше 7 лет и взрослых - 1 мл.
Прививки проводят подкожно шприцем или с помощью безыгольного инъектора 4 раза с интервалом между первой и второй, второй и третьей и, наконец, третьей и четвертой прививками соответственно 7-10, 14-20 дней и 4-6 мес. С учетом этих интервалов курс иммунизации начинают в такие сроки, когда последняя, четвертая прививка будет сделана за 2-3 недели до возможного нападения клещей на вакцинируемого. В последующем привитых ежегодно ревакцинируют. Местные и общие реакции на прививку регистрируются сравнительно редко.
Основными противопоказаниями к прививкам против клещевого энцефалита являются повышенная температура тела, инфекционные и системные заболевания.
Установлено, что инактивированная жидкая сорбированная вакцина против клещевого энцефалита обеспечивает формирование поствакцинального иммунитета определенного уровня у полноценно привитых ею людей. Однако в первую очередь громоздкость не всегда полноценно реализуемой по разным причинам схемы вакцинации и успехи молекулярной биологии последних лет явились причиной разработки инактивированной вакцины против клещевого энцефалита высоко очищенной и концентрированной с помощью методов градиентного ультрацентрифугирования или хроматографии, которая в настоящее время интенсивно изучается. Имеются основания полагать, что прививки этой вакциной при существенно менее сложной и быстро реализуемой схеме вакцинации создадут у привитых ею людей более напряженный иммунитет к клещевому энцефалиту.
Маточные культуры производственного штамма хранятся в виде мозговой ткани зараженных белых мышей, которую сохраняют в глицерине при -20°С. Суспензия мозга белых мышей, зараженных вирусом 3-го пассажа, используется для производства вакцины.
Вначале подготавливают взвешенную культуру клеток, для чего отбирают полученных из специального хозяйства жизнеспособных куриных эмбрионов 9-10-дневного возраста, извлекают их из яиц и по 50- 55 измельченных тушек обрабатывают 1% раствором трипсина Дифко при 32°С. После центрифугирования со скоростью 500-700 об/мин взвесь клеток (осадок) сливают в бутыли, ресуспендируют в среде № 199 с добавлением гидролизата лактальбумина и бычьей сыворотки.
Затем взвесь клеток заражают подготовленной мозговой суспензией вируса. Зараженные клетки инкубируют при 37°С в течение 48-68 ч и определяют концентрацию вируса. Если титр вируса в вируссодержащей жидкости не меньше 107 LD в 1 мл, в бутыль добавляют формалин до конечной его концентрации 1:2000 и выдерживают ее 10 дней при 12-14°С, интенсивно перемешивая содержимое 2-3 раза в день по 3-5 мин.
После завершения инактивации и контроля на безопасность культуральную жидкость фильтруют и сорбируют гидроокисью алюминия, который добавляют в количестве 1-2 мг на 1 мл. Готовый препарат разливают по 5-10 мл в ампулы.
В процессе контроля вакцины исследуют:
- физические свойства (жидкая вакцина должна иметь вид гомогенного раствора розового цвета без осадка, хлопьев и посторонних включений и опалесцировать вследствие наличия сорбента);
- стерильность (посевы на разные питательные среды должны оставаться стерильными);
- иммуногенность;
- антигенность;
- безвредность.
Если результаты контрольных исследований соответствуют перечисленным требованиям, вакцину передают для прививок против клещевого энцефалита.
Срок годности жидкой вакцины 2 года при условии правильной транспортировки и хранения препарата в сухом темном месте при 4-10°С.
Применяют вакцину для вакцинации и последующей ежегодной ревакцинации детей и взрослых в возрасте от 4 до 70 лет, подверженных нападению клещей, в пределах природных очагов клещевого энцефалита.
Разовая прививочная доза для детей 4-7 лет 0,5 мл, а для детей старше 7 лет и взрослых - 1 мл.
Прививки проводят подкожно шприцем или с помощью безыгольного инъектора 4 раза с интервалом между первой и второй, второй и третьей и, наконец, третьей и четвертой прививками соответственно 7-10, 14-20 дней и 4-6 мес. С учетом этих интервалов курс иммунизации начинают в такие сроки, когда последняя, четвертая прививка будет сделана за 2-3 недели до возможного нападения клещей на вакцинируемого. В последующем привитых ежегодно ревакцинируют. Местные и общие реакции на прививку регистрируются сравнительно редко.
Основными противопоказаниями к прививкам против клещевого энцефалита являются повышенная температура тела, инфекционные и системные заболевания.
Установлено, что инактивированная жидкая сорбированная вакцина против клещевого энцефалита обеспечивает формирование поствакцинального иммунитета определенного уровня у полноценно привитых ею людей. Однако в первую очередь громоздкость не всегда полноценно реализуемой по разным причинам схемы вакцинации и успехи молекулярной биологии последних лет явились причиной разработки инактивированной вакцины против клещевого энцефалита высоко очищенной и концентрированной с помощью методов градиентного ультрацентрифугирования или хроматографии, которая в настоящее время интенсивно изучается. Имеются основания полагать, что прививки этой вакциной при существенно менее сложной и быстро реализуемой схеме вакцинации создадут у привитых ею людей более напряженный иммунитет к клещевому энцефалиту.