Аллергические реакции, опосредованные т-клетками
Феномен сенсибилизации, опосредованной Т-клетками известен уже с конца XIX века, когда Jenner осуществил первые прививки. Но только после работ R. Koch в последнем десятилетии прошлого века этот тип реакций стал объектом интенсивных научных исследований. С филогенетической точки зрения этот эффект появился намного раньше, чем выработка антител. Ранее употребляли термин «аллергия (или гиперчувствительность) замедленного типа» для отражения затяжного характера реакции, например, кожных проявлений, которые иногда развиваются только через 24-48 ч. Указанное название не отражает сути специфической формы аллергической реакции. Решающим является тот факт, что она не зависит от наличия циркулирующих или связанных иммуноглобулинов, как это характерно для I-III типов, а обусловлена иммунокомпетентными клетками. Отсюда и появилось название «сенсибилизация клеточного типа». К сожалению, этот термин вызвал неверное толкование, так как аллергические реакции, вызванные реагинами или цитотоксичными антителами, также связаны с клетками. По этой причине было предложено название «реакция, опосредования Т-клетками», а в англоязычном тексте «клеточно-опосредованный иммунитет».
Эта реакция также демонстрирует возможность защитного и патогенного действия одного и того же механизма, поскольку с реакциями клеточного иммунитета связаны, с одной стороны, инфекционные заболевания и защита от опухолей, а с другой - контактные экземы, агрессивные аутоиммунные заболевания.
Важные данные об этой реакции были получены в эксперименте. Так, клеточный тип сенсибилизации может быть вызван у всех видов животных, хотя реакция значительно варьирует у отдельных видов, а частично и отдельных особей. Имеет значение также возраст и пол.
Сенсибилизация. Все сказанное о процессах сенсибилизации справедливо и для процессов, обусловленных Т-клетками. Решающим фактором в данном случае является презентация антигена совместно с продуктами МНС класса II, весьма существенную роль играют также вид антигена и форма его введения. Многочисленные результаты позволяют свести все многообразие процессов к нескольким основным моделям. Значимым фактором является доза антигена: минимальные количества (0,1 мкг внутрикожно) не вызывают устойчивой клеточной сенсибилизации, а более высокие дозы (0,5 мкг) приводят к реакциям Т-клеточного типа.
Сенсибилизация микроорганизмами. Аллергия клеточного типа развивается вслед за многочисленными инфекциями. Наиболее известен пример туберкулеза; бруцеллезные, пневмо- и стрептококковые инфекции, тиф, дифтерия, микозы, гельминтозы также характеризуются проявлениями данной формы сенсибилизации.
Примечательно, что живые внутриклеточные возбудители вызывают преимущественно клеточный тип ответа. Для достижения этой цели убитые вакцины или антигенные экстракты следует вводить в присутствии адъюванта Фрейнда. Причины феномена изучаются. Эти исследования имеют не только теоретическое, но и практическое значение, так как направлены на разработку эффективных прививок или других форм иммунотерапии.
Сенсибилизация протеинами. До сих пор аллергические реакции замедленного типа удавалось вызвать при помощи белков или содержащих их антигенов. Об иммуногенности других соединений, в особенности полисахаридов, высказывались разные мнения.
Решающее значение для индукции клеточной формы аллергических реакций имеет способ введения антигена. При внутрикожном введении антиген попадает преимущественно в регионарные лимфатические узлы. Дозы 1-2 мкг между 5-м и 8-м днями вызывают транзиторную сенсибилизацию Т-клеточного типа, а затем антителообразование. Если доза антигена еще выше, то через 6-8 дней наблюдается выработка антител, а клеточную реакцию обнаружить практически невозможно. Сенсибилизацию минимальными количествами антигена называют по имени ученых, впервые ее описавших, т. е. типом Джонса-Мота. Uhr и соавт. смогли вызвать у морской свинки реакцию клеточного типа путем внутрикожного введения комплекса антиген-антитело в области избытка антител. У детей вакцинация дифтерийным токсином, частично нейтрализованным антитоксином, может вызывать псевдореакцию Шика, которая соответствует аллергической реакции клеточного типа. Существует предположение, что образование комплексов блокирует значительную часть антигенов, в результате чего сенсибилизация возникает даже при минимальных дозах антигена.
Сенсибилизация гаптенами или конъюгированными белками. К. Landsteiner и J. С. Chase установили, что данные опыты по иммунизации влекут за собой Т-клеточную сенсибилизацию к белку-носителю или фрагменту сцепления носителя и гаптена возможно, при этом вырабатываются антитела к гаптену. Если молекула носителя иммуногенностью не обладала, то сенсибилизация Т-клеточного типа вырабатывалась к гаптену и участку его связывания.
Этот вид сенсибилизации имеет практическое значение при развитии контактной аллергии. При аппликации химически простых веществ (пикрилхлорида, динитрохлорфенола, медикаментов или растительных препаратов) на кожу возникает аллергический дерматит со специфическими морфологическими и иммунологическими изменениями, характерными для аллергии, опосредованной Т-клетками. По данным многочисленных исследователей, при контакте через амино- или сульфгидрильные группы образуется комплексный антиген с белком кожи, который как конъюгированный антиген вызывает аллергическую реакцию клеточного типа.
Механизмы. При данном типе аллергии в реакцию вступают специфически сенсибилизированные Т-лимфоциты и антиген в растворенной или гранулированной форме. Тип участвующих в реакции клеток, по крайней мере в случае патологии человека, в настоящее время окончательно не установлен. У мышей цитотоксичность обусловлена Т-клетками. В типичных кожных реакциях и аналогичных процессах решающую роль играют клетки, обозначаемые TDTH. Существуют многочисленные указания о существовании подобной ситуации у человека, однако убедительные доказательства пока отсутствуют. Реакция инициируется при связывании антигена с Ti-рецептором, после чего сигнал переносится в клетку ассоциированной с рецептором молекулой CD 3. Необходимым условием является одновременное связывание Т-клетки как с антигеном, так и с продуктами МНС антигенпрезентирующих клеток (класса I в случае цитотоксической реакции и класса II в случае TDTH). Нельзя, однако, исключить возможности существования особой субпопуляции клеток, распознающей и связывающей антиген без участия продуктов МНС. В результате одновременного «двойного распознавания» антигена и продуктов МНС начинается пролиферация клеток (трансформация лимфоцитов), высвобождение лимфокинов и реализуются цитотоксические эффекты. До сих пор не вполне ясна взаимосвязь между этими тремя процессами. Несомненно, что пролиферация важна для всех участвующих в реакции клеток, однако для CD 4+ лимфоцитов ее роль более значима, чем для клеток CD 8+. Высвобождение лимфокинов и цитотоксичность от пролиферации не зависят. Поскольку экспериментальные данные получены в подавляющем большинстве случаев in vitro, они не могут быть механически перенесены на модели in vivo, хотя и дали возможность сделать ряд важных выводов.
Трансформация лимфоцитов в бласты и стимуляция к митозу могут быть вызваны как специфическим, так и неспецифическим образом.
Стимуляция индуцируется реакцией антигена со специфическими Т-рецепторами на поверхности лимфоцита. Так как только небольшое количество клеток несет рецепторы к данному антигену, уровень бласттрансформации значительно ниже, чем при неспецифической стимуляции. В зависимости от продолжительности взаимодействия с антигеном количество бластных клеток может достигать через 5-7 дней максимальных значений (до 10-20%). Отчасти это обусловлено пролиферацией первично сенсибилизированных клеток, отчасти вторичным включением клеток через систему медиаторов. Как правило, необходимым условием для стимуляции является контакт с антигеном, предварительно переработанным макрофагами. В первые 12 ч после взаимодействия с антигеном особенно активизируются процессы синтеза белков и РНК, позднее (через 30 ч) - ДНК. Клетки при этом увеличиваются, ядра становятся более рыхлыми. Через 40-48 ч происходит деление клеток, интенсивность их окраски пиронином обусловлена высоким содержанием РНК в цитоплазме, прежде всего в виде свободных рибо- и полисом. Установлено, что большинство трансформированных лимфоцитов не идентично клеткам, выделяющим описываемые ниже медиаторы и действующим непосредственно как эффекторы. Большую долю пролиферирующих клеток составляют Т-хелперы. В- и Т-клетки могут быть стимулированы неспецифически (митогенами). Специфическая стимуляция антигеном влияет прежде всего на Т-клетки. Так как В-клеточная пролиферация, вызванная антигеном, значительно меньше и реализуется только при одновременной активации Т-клеток, тест бласттрансформации лимфоцитов является информативным для оценки сенсибилизации Т-лимфоцитов.
Медиаторы (лимфокины). Лимфокинами называют продукты секреции активированных лимфоцитов. Особенно интенсивный синтез медиаторов отмечают при Т-клеточной стимуляции, хотя некоторые лимфокины характерны для активации В-клеток. Выявление лимфокинов нельзя интерпретировать a priori как доказательство опосредованной Т-клетками сенсибилизации. Кроме того, высвобождение лимфокинов характерно не только для антигенной стимуляции, оно может быть вызвано и неспецифическими митогенами. Выделение лимфокинов происходит, как правило, независимо от бласттрансформации. Особенно четко это проявляется при наблюдаемых иногда случаях диссоциации обоих механизмов. Лимфокинпродуцирующие клетки должны, несомненно, обладать способностью к трансформации и пролиферации.
Инициирующий механизм определяется связыванием антигена с Ti-рецептором, после чего CD 3-молекула переносит сигнал в клетку. Ход дальнейших процессов опосредован через цАМФ. Увеличение коэффициента цАМФ/цГМФ подавляет высвобождение медиаторов, гистамин действует при этом через Н2-рецепторы. Медиаторы важны, с одной стороны, из-за их модулирующего влияния на сенсибилизацию (усиление или торможение как В-, так и Т-клеточных реакций), с другой - из-за разносторонних действий в эффекторной фазе иммунного ответа.
Новые данные свидетельствуют о том, что выделение «кинов» не является специфической особенностью только лимфоцитов. Аналогичным образом макрофаги или моноциты секретируют «монокины». Вероятно, эти медиаторы являются отдельными примерами универсальной системы «цитокинов», отвечающих за межклеточные взаимодействия и за рамками иммунных реакций.
Несмотря на многочисленность невыясненных факторов, определение данных медиаторов нашло широкое распространение в диагностике. Можно выделить две группы медиаторов: 1 - влияющие на клетки фагоцитарной системы; 2- действующие непосредственно на структуры- или клетки-мишени.
Кроме того, существует еще целый ряд лимфокинов, классифицировать которые пока невозможно.
Медиаторы, действующие на фагоцитоз. Факторы хемотаксиса. Исследования в камере Boyden показали, что под влиянием антигена из сенсибилизированных лимфоцитов выделяется фактор, оказывающий хемотаксическое действие на мононуклеарные клетки. Он инактивируется при нагревании, чувствителен к действию химотрипсина и не идентичен ФУМ. Это вещество выявляют при использовании лейкоцитарной массы в реакции торможения миграции лейкоцитов. Стимулированные лимфоциты выделяют также факторы для всех трех типов гранулоцитов. Они не идентичны факторам, действующим на макрофаги, а их относительная молекулярная масса составляет 24-55 К. На эозинофилы влияют два различных фактора; один из них, вероятно, в сочетании с иммунным комплексом. Фактор, воздействующий на базофилы, играет важную роль в реакции Джонса-Мота (кожная базофильная аллергия).
Фактор, угнетающий миграцию макрофагов (ФУМ, MIF). Данный фактор еще не точно идентифицирован по химическому составу. Его синтез начинается примерно через 6-8 ч после контакта с антигеном и продолжается в течение 4 последующих дней. Блокада синтеза белка, например пуро- или митомицином, подавляет синтез ФУМ. Химотрипсин и нейраминидаза подавляют его активность. Фактор не диализуется, термолабилен (30 мин при 56 °С) и резистентен к действию РНКазы и ДНКазы. Его относительная молекулярная масса составляет 25 К. Вероятно, речь идет о кислом гликопротеине с небольшим количеством сиаловой кислоты. Расчеты показали, что ФУМ, секретируемый сенсибилизированными при контакте с антигеном лимфоцитами, может угнетать миграцию нескольких тысяч макрофагов. Его действие преходяще - уже через 36-48 ч миграция может возобновляться. Вероятно, уменьшается поверхностный потенциал и изменяется проницаемость мембраны. Для реализации действия ФУМ большое значение, по-видимому, имеет L-фукоза клеточной мембраны. Ограничение действия ФУМ происходит под влиянием клеточной эстеразы. Для диагностики в тесте in vitro можно определять изменение миграции макрофагов, т. е. способность к расселению на поверхности (стекле, пластике).
Действие ФУМ важно для скопления макрофагов в очаге аллергической реакции. Хемотаксически вовлеченные клетки иммобилизуются и захватываются как бы на «клейкую ленту». Замедленное протекание аллергической реакции можно было бы объяснить тем, что сначала постепенно накапливаются сенсибилизированные лимфоциты, которые синтезируют ФУМ, а затем этот фактор оказывает влияние на макрофаги. При местном введении сначала наблюдают мононуклеарную инфильтрацию (через 4 ч). Позднее обнаруживают и полиморфно-ядерные гранулоциты. При более высоких концентрациях рассматриваемого фактора развивается некроз. Антигензависимая активность ФУМ пока изучена мало.
Фактор, замедляющий движение макрофагов. Фактор секретируется уже через 1-4 ч после контакта с антигеном, он снижает скорость перемещения макрофагов в электрическом поле (определение с помощью МЕМ-теста).
Существование независимого от ФУМ фактора агрегации макрофагов до настоящего времени не подтверждено. У человека удалось выявить фактор, угнетающий миграцию лейкоцитов (ФУЛ, LIF), с мол. м. 69 К, который не оказывает влияния на макрофаги. ФУЛ не диализуется и устойчив к нагреванию. Возможно, что в данном случае речь идет о протеазе. Т-клетки, по-видимому, секретируют преимущественно ФУЛ, а В-клетки - ФУМ.
Фактор исчезновения макрофагов. После парентерального введения антигена этот фактор вызывает адгезию макрофагов на стенках брюшной полости, причем в экссудате макрофаги не обнаруживаются. Данный фактор либо близок к ФУМ, либо идентичен ему.
Фактор, активирующий макрофаги, способствует активации макрофагов (моноцитов) с увеличением их размеров, повышением интенсивности обмена веществ и пиноцитоза, утратой базофилии. Имеются сообщения и о факторе резистентности макрофагов к действию бактерий и вирусов. Он изучен недостаточно. И, наконец, можно повысить уровень защитного иммунитета за счет цитофильных антител. Активированные макрофаги играют важную роль в иммунном ответе, опосредованном Т-клетками. При активации в макрофагах появляется и увеличивается число внутриклеточных гранул, начинается синтез и секреция нейтральных протеаз, появляется способность к адгезии на клетках эндотелия, начинается секреция активатора плазминогена. Результатом активации макрофагов может быть значительное повреждение тканей.
Медиаторы, действующие на клетки-мишени. Супернатанты культур лимфоцитов индуцированных антигеном, оказывают выраженное цитотоксическое действие на другие культуры. За этот эффект отвечают различные медиаторы.
I. Лимфоцитотоксины. В разных лабораториях из малых лимфоцитов были выделены растворимые цитотоксины. Несмотря на их гетерогенность, отмечены общие свойства. Они вырабатываются не только в ответ на контакт со специфическим антигеном, но и при неспецифических стимулах, например под влиянием митогенов. Их цитотоксическое действие направлено на различные клетки-мишени. Лучше всего изучен цитотоксин, описанный Granger. Его продукция идет параллельно синтезу РНК, синтезу белка и активности обмена веществ. С интенсивностью синтеза ДНК и митотическим индексом взаимосвязи не установлено. Выработка этого токсина подавляется гидрокортизоном, пуромицином и другими ингибиторами обмена веществ.
Лимфоцитотоксины вырабатываются, вероятно, только Т-клетками. Фракционирование с хроматографией позволило выделить а- и b-лимфоцитотоксины (отн. мол. м. 45 К). Их можно обнаружить уже через 6 ч. Однако до 20-го часа преобладает 6-, через 3-5 дней - а-лимфотоксин, который значительно стабильней. При действии на клетки-мишени различают два типа цитолиза. В одном случае клетка набухает, обычно после 1-2-часового воздействия. В другом случае через 3-5 мин клетка сжимается, что сопровождается интенсивным изменением ее содержимого. В клетках, вырабатывающих лимфоцитотоксины, важную роль играют механизмы синтеза и секреции. Возможно, в процессе продукции этих факторов активируется серинэстераза. К синтезу ДНК, напротив, эти события отношения не имеют.
Цитотоксический эффект можно обнаружить следующим образом:
- с помощью подсчета жизнеспособных лимфоцитов в культуре клеток-мишеней;
- путем учета выхода изотопов из разрушенных клеток в культуральную среду. Связанный с мембраной 51Сг менее пригоден.
b-Лимфоцитотоксин является ответственным в первую очередь за цитотоксичные эффекты, а а-, вероятно, тесно связан с неспецифическим супрессорным фактором.
II. Цитотоксические факторы. В отличие от лимфоцитотоксинов они секретируются другими мононуклеарными клетками. ЦТФ могут вырабатываться также малыми лимфоцитами. Если крупные активированные клетки секретируют фактор уже через 3 ч, то для покоящихся лимфоцитов необходимо 48-72 ч. Выделяемый крупными мононуклеарными клетками ЦТФ стабилен к нагреванию, его относительная молекулярная масса составляет около 1000 К. Химическая природа этого соединения пока не известна, речь идет скорее всего о фосфолипиде. Его цитотоксическое действие зависит от температуры.
В этих лимфотоксинах длительное время видели биохимическую основу Т-клеточной цитотоксичности. Новые экспериментальные данные показали отсутствие убедительной корреляции между продукцией этих медиаторов и цитотоксический эффектом. Антисыворотки к лимфотоксинам незначительно влияют на клеточную цитотоксичность. Таким образом, в патогенетическом плане на первый план выходят мембранные эффекты. Тем не менее эти факторы могут участвовать в повреждении тканей, обусловленном Т-клеточными реакциями.
Фактор, ингибирующий пролиферацию, и фактор, ингибирующий клонирование. Стимулированные антигеном, сенсибилизированные лимфоциты выделяют растворимое вещество, ингибирующее клеточное деление. Оно термостабильно, разрушается под влиянием трипсина; его действие видоспецифично. In vivo этот фактор имеет особое значение для предотвращения злокачественного роста. CIF подавляет клональный рост клеточных культур. Он не диализуется и отличается от PIF своей термолабильностью. Вероятно, оба эффекта опосредованы лимфоцитотоксинами.
III. Прочие медиаторы. Диализуемый экстракт лейкоцитов называют также фактором переноса (ФП). Он содержит смесь низкомолекулярных соединений (2-6 К). Надежды использовать ФП для бесклеточного переноса специфических иммунных реакций до настоящего времени не оправдались: на первом плане стоят эффекты активации и стимуляции дифференцировки лимфоцитов. Их значение для реакции типа IV пока неясно.
Кожно-реактивный фактор. Секреция этого фактора может быть вызвана как антигеном, так и неспецифическими стимуляторами (митогенами). Фактор выявляют через 8 ч в супернатанте стимулированных культур лимфоцитов, его молярная масса около 70 К. Продукция кожно-реактивного фактора подавляется ингибиторами синтеза белка и ДНК-зависимого синтеза РНК. При 56 °С фактор инактивируется частично, а при 100°С полностью. Он чувствителен к действию протеолитических ферментов, особенно пепсина. При электрофорезе фактор мигрирует в зону преальбумина и альбумина. Внутрикожная инъекция приводит к воспалительной реакции через 3-5 ч с максимумом через 8-12 ч. Гистологическая картина воспаления соответствует клеточному типу иммунной реакции. Возможно, что описанный феномен является результатом действия не одного, а целого ряда описанных выше медиаторов. С активностью кинина может быть связано изменение проницаемости сосудов. Кортизон подавляет кожную реакцию, однако не влияет на секрецию самого фактора.
Фактор проницаемости лимфоузлов впервые был обнаружен после ультразвукового разрушения клеток лимфатических узлов. Позже было показано, что он секретируется при аллергических реакциях Т-клеточного типа (туберкулиновой реакции, контактной сенсибилизации, ревматоидном артрите и тиреоидите). Он неустойчив к нагреванию, но устойчив к действию протеолитических ферментов.
Фактор активации остеокластов (ФАО) был обнаружен в многодневной культуре клеток. Его мол. м. лежит в пределах 13-25 К. ФАО устойчив к нагреванию и инактивируется протеолитическими ферментами. Активность медиатора определяется по освобождению 45Са из костной ткани. ФАО играет определенную роль при ревматоидном артрите, а также, возможно, при кариесе.
Фактор активации прокоагуляции (тканевый фактор) нормализует время свертывания плазмы, дефицитной по фактору VIII, однако неидентичен ему, из-за высокой лабильности до настоящего времени не охарактеризован, однако с его помощью можно объяснить ряд случаев частично выраженного отложения фибрина.
Колониестимулирующий фактор индуцирует дифференцировку стволовых клеток костного мозга в гранулоциты и моноциты. Фактор был выявлен после длительной стимуляции клеток митогеном и представляет собой термостабильный гликопротеин с мол. м. 40- 60К.
Приведенный перечень ни в коем случае не может считаться исчерпывающим. Использование новых методов, несомненно, приведет к выявлению неизвестных ранее активных факторов. С другой стороны, в настоящее время отсутствуют строгие доказательства того, что наблюдаемые эффекты обусловлены различными медиаторами. Совершенствование наших знаний может привести к сокращению числа известных лимфокинов.
Медиаторы могут секретироваться как Т-, так и В-клетками, хотя и существуют определенные различия. Лимфотоксины, митогенные факторы и колониестимулирующий фактор вырабатываются Т-клетками, ФУМ, ФУЛ, хемотактические факторы и интерферон могут секретироваться как Т-, так и В-клетками.
Активность лимфокинов in vivo. Большинство лимфокинов обнаруживается в супернатанте культур лимфоцитов, активированных антигеном. Их секреция in vivo возможна, но наблюдается не во всех случаях. Это справедливо, например, для кожно-реактивного фактора или фактора «исчезновения» макрофагов. ФУМ обнаруживают в сыворотке после воздействия клеток с антигеном, в синовиальной жидкости присутствуют ФУМ, ФУЛ. В афферентной лимфе регионарных лимфатических узлов после стимуляции можно выявить ФУМ (MIF) и митогенную активность, что связано с повышенной скоростью протекания жидкости через эти органы и с усиленным «вымыванием» лимфоцитов. Повышенная концентрация ФУМ в сыворотке была обнаружена как при В-, так и при Т-клеточной пролиферациях (плазмоцитома, синдром Сезари, болезнь Ходжкина, саркоидоз). Убедительным доказательством значения лимфокинов in vivo является выраженная реакция при введении антисывороток к лимфокинам.
Инъекция преформированных медиаторов в афферентную лимфу может вызвать в лимфатических узлах такие же изменения, что и после взаимодействия с антигеном: увеличение массы, числа клеток, растяжение паракортикальной области, а также рост зародышевых центров. Лимфокины играют важную роль не только при местных аллергических реакциях, но и непосредственно в лимфатических узлах.
Т-клеточная цитотоксичность. Ранее уже отмечалось, что повреждение клеток может осуществляться самыми разными механизмами. В настоящем разделе представлены факты о механизмах клеточной цитотоксичности. Все они могут быть сведены к нескольким основным моделям, хотя in vivo существуют их комбинации. Оценка цитотоксичности может осуществляться микроскопически, с помощью цитрайферной съемки, по пролиферации клеток, высвобождению радиоактивной метки или выявлению изменений внутри клеточного обмена веществ. Цитотоксические Т-лимфоциты активируются путем связывания на клетке антигена в комплексе с продуктами МНС класса II через рецепторы Ti и CD 8. Однако существуют доказательства существования субпопуляций, для которых отсутствует рестрикция по продуктам МНС.
Цитотоксическое действие активированных макрофагов. С развитием клеточной сенсибилизации макрофаги приобретают специфические цитотоксические свойства, которые играют важную роль в противоинфекционном иммунитете. Механизм пока не известен. Посредством ФУМ, ФХ и других медиаторов можно вызывать неспецифическую активацию. Оба механизма обусловливают цитотоксичность in vitro, чему способствует обилие ферментов в этих клетках. Эксперименты свидетельствуют о большом значении данного эффекта in vivo (например, противоинфекционный или противоопухолевый иммунитет). Макрофаги несут рецепторы к определенным классам Ig (цитофильные антитела), вследствие чего проявляются их цитотоксичные свойства при гуморальном типе сенсибилизации.
В конечном счете создается довольно высокий потенциал цитотоксичности, который служит основой защитной функции организма против возбудителей заболеваний или аномальных клеток. В первую очередь речь идет о проявлении специфической цитотоксичности Т-клеток-эффекторов и воздействии специфически «армированных» макрофагов. При этом играют роль и неспецифические механизмы, действующие через лимфокины или активированные макрофаги.
Возможность переноса состояния сенсибилизации. В отличие от гуморальной сенсибилизации перенос клеточного иммунитета возможен только с помощью жизнеспособных и обладающих функциональной активностью Т-клеток. Особое место занимает фактор переноса. Важную роль играют реакции организма, опосредованные лимфокинами. Все эти предпосылки создают условия для адаптивного переноса иммунитета.
Читать далее Проявления аллергической реакции клеточного типа
Эта реакция также демонстрирует возможность защитного и патогенного действия одного и того же механизма, поскольку с реакциями клеточного иммунитета связаны, с одной стороны, инфекционные заболевания и защита от опухолей, а с другой - контактные экземы, агрессивные аутоиммунные заболевания.
Важные данные об этой реакции были получены в эксперименте. Так, клеточный тип сенсибилизации может быть вызван у всех видов животных, хотя реакция значительно варьирует у отдельных видов, а частично и отдельных особей. Имеет значение также возраст и пол.
Сенсибилизация. Все сказанное о процессах сенсибилизации справедливо и для процессов, обусловленных Т-клетками. Решающим фактором в данном случае является презентация антигена совместно с продуктами МНС класса II, весьма существенную роль играют также вид антигена и форма его введения. Многочисленные результаты позволяют свести все многообразие процессов к нескольким основным моделям. Значимым фактором является доза антигена: минимальные количества (0,1 мкг внутрикожно) не вызывают устойчивой клеточной сенсибилизации, а более высокие дозы (0,5 мкг) приводят к реакциям Т-клеточного типа.
Сенсибилизация микроорганизмами. Аллергия клеточного типа развивается вслед за многочисленными инфекциями. Наиболее известен пример туберкулеза; бруцеллезные, пневмо- и стрептококковые инфекции, тиф, дифтерия, микозы, гельминтозы также характеризуются проявлениями данной формы сенсибилизации.
Примечательно, что живые внутриклеточные возбудители вызывают преимущественно клеточный тип ответа. Для достижения этой цели убитые вакцины или антигенные экстракты следует вводить в присутствии адъюванта Фрейнда. Причины феномена изучаются. Эти исследования имеют не только теоретическое, но и практическое значение, так как направлены на разработку эффективных прививок или других форм иммунотерапии.
Сенсибилизация протеинами. До сих пор аллергические реакции замедленного типа удавалось вызвать при помощи белков или содержащих их антигенов. Об иммуногенности других соединений, в особенности полисахаридов, высказывались разные мнения.
Решающее значение для индукции клеточной формы аллергических реакций имеет способ введения антигена. При внутрикожном введении антиген попадает преимущественно в регионарные лимфатические узлы. Дозы 1-2 мкг между 5-м и 8-м днями вызывают транзиторную сенсибилизацию Т-клеточного типа, а затем антителообразование. Если доза антигена еще выше, то через 6-8 дней наблюдается выработка антител, а клеточную реакцию обнаружить практически невозможно. Сенсибилизацию минимальными количествами антигена называют по имени ученых, впервые ее описавших, т. е. типом Джонса-Мота. Uhr и соавт. смогли вызвать у морской свинки реакцию клеточного типа путем внутрикожного введения комплекса антиген-антитело в области избытка антител. У детей вакцинация дифтерийным токсином, частично нейтрализованным антитоксином, может вызывать псевдореакцию Шика, которая соответствует аллергической реакции клеточного типа. Существует предположение, что образование комплексов блокирует значительную часть антигенов, в результате чего сенсибилизация возникает даже при минимальных дозах антигена.
Сенсибилизация гаптенами или конъюгированными белками. К. Landsteiner и J. С. Chase установили, что данные опыты по иммунизации влекут за собой Т-клеточную сенсибилизацию к белку-носителю или фрагменту сцепления носителя и гаптена возможно, при этом вырабатываются антитела к гаптену. Если молекула носителя иммуногенностью не обладала, то сенсибилизация Т-клеточного типа вырабатывалась к гаптену и участку его связывания.
Этот вид сенсибилизации имеет практическое значение при развитии контактной аллергии. При аппликации химически простых веществ (пикрилхлорида, динитрохлорфенола, медикаментов или растительных препаратов) на кожу возникает аллергический дерматит со специфическими морфологическими и иммунологическими изменениями, характерными для аллергии, опосредованной Т-клетками. По данным многочисленных исследователей, при контакте через амино- или сульфгидрильные группы образуется комплексный антиген с белком кожи, который как конъюгированный антиген вызывает аллергическую реакцию клеточного типа.
Механизмы. При данном типе аллергии в реакцию вступают специфически сенсибилизированные Т-лимфоциты и антиген в растворенной или гранулированной форме. Тип участвующих в реакции клеток, по крайней мере в случае патологии человека, в настоящее время окончательно не установлен. У мышей цитотоксичность обусловлена Т-клетками. В типичных кожных реакциях и аналогичных процессах решающую роль играют клетки, обозначаемые TDTH. Существуют многочисленные указания о существовании подобной ситуации у человека, однако убедительные доказательства пока отсутствуют. Реакция инициируется при связывании антигена с Ti-рецептором, после чего сигнал переносится в клетку ассоциированной с рецептором молекулой CD 3. Необходимым условием является одновременное связывание Т-клетки как с антигеном, так и с продуктами МНС антигенпрезентирующих клеток (класса I в случае цитотоксической реакции и класса II в случае TDTH). Нельзя, однако, исключить возможности существования особой субпопуляции клеток, распознающей и связывающей антиген без участия продуктов МНС. В результате одновременного «двойного распознавания» антигена и продуктов МНС начинается пролиферация клеток (трансформация лимфоцитов), высвобождение лимфокинов и реализуются цитотоксические эффекты. До сих пор не вполне ясна взаимосвязь между этими тремя процессами. Несомненно, что пролиферация важна для всех участвующих в реакции клеток, однако для CD 4+ лимфоцитов ее роль более значима, чем для клеток CD 8+. Высвобождение лимфокинов и цитотоксичность от пролиферации не зависят. Поскольку экспериментальные данные получены в подавляющем большинстве случаев in vitro, они не могут быть механически перенесены на модели in vivo, хотя и дали возможность сделать ряд важных выводов.
Трансформация лимфоцитов в бласты и стимуляция к митозу могут быть вызваны как специфическим, так и неспецифическим образом.
Стимуляция индуцируется реакцией антигена со специфическими Т-рецепторами на поверхности лимфоцита. Так как только небольшое количество клеток несет рецепторы к данному антигену, уровень бласттрансформации значительно ниже, чем при неспецифической стимуляции. В зависимости от продолжительности взаимодействия с антигеном количество бластных клеток может достигать через 5-7 дней максимальных значений (до 10-20%). Отчасти это обусловлено пролиферацией первично сенсибилизированных клеток, отчасти вторичным включением клеток через систему медиаторов. Как правило, необходимым условием для стимуляции является контакт с антигеном, предварительно переработанным макрофагами. В первые 12 ч после взаимодействия с антигеном особенно активизируются процессы синтеза белков и РНК, позднее (через 30 ч) - ДНК. Клетки при этом увеличиваются, ядра становятся более рыхлыми. Через 40-48 ч происходит деление клеток, интенсивность их окраски пиронином обусловлена высоким содержанием РНК в цитоплазме, прежде всего в виде свободных рибо- и полисом. Установлено, что большинство трансформированных лимфоцитов не идентично клеткам, выделяющим описываемые ниже медиаторы и действующим непосредственно как эффекторы. Большую долю пролиферирующих клеток составляют Т-хелперы. В- и Т-клетки могут быть стимулированы неспецифически (митогенами). Специфическая стимуляция антигеном влияет прежде всего на Т-клетки. Так как В-клеточная пролиферация, вызванная антигеном, значительно меньше и реализуется только при одновременной активации Т-клеток, тест бласттрансформации лимфоцитов является информативным для оценки сенсибилизации Т-лимфоцитов.
Медиаторы (лимфокины). Лимфокинами называют продукты секреции активированных лимфоцитов. Особенно интенсивный синтез медиаторов отмечают при Т-клеточной стимуляции, хотя некоторые лимфокины характерны для активации В-клеток. Выявление лимфокинов нельзя интерпретировать a priori как доказательство опосредованной Т-клетками сенсибилизации. Кроме того, высвобождение лимфокинов характерно не только для антигенной стимуляции, оно может быть вызвано и неспецифическими митогенами. Выделение лимфокинов происходит, как правило, независимо от бласттрансформации. Особенно четко это проявляется при наблюдаемых иногда случаях диссоциации обоих механизмов. Лимфокинпродуцирующие клетки должны, несомненно, обладать способностью к трансформации и пролиферации.
Инициирующий механизм определяется связыванием антигена с Ti-рецептором, после чего CD 3-молекула переносит сигнал в клетку. Ход дальнейших процессов опосредован через цАМФ. Увеличение коэффициента цАМФ/цГМФ подавляет высвобождение медиаторов, гистамин действует при этом через Н2-рецепторы. Медиаторы важны, с одной стороны, из-за их модулирующего влияния на сенсибилизацию (усиление или торможение как В-, так и Т-клеточных реакций), с другой - из-за разносторонних действий в эффекторной фазе иммунного ответа.
Новые данные свидетельствуют о том, что выделение «кинов» не является специфической особенностью только лимфоцитов. Аналогичным образом макрофаги или моноциты секретируют «монокины». Вероятно, эти медиаторы являются отдельными примерами универсальной системы «цитокинов», отвечающих за межклеточные взаимодействия и за рамками иммунных реакций.
Несмотря на многочисленность невыясненных факторов, определение данных медиаторов нашло широкое распространение в диагностике. Можно выделить две группы медиаторов: 1 - влияющие на клетки фагоцитарной системы; 2- действующие непосредственно на структуры- или клетки-мишени.
Кроме того, существует еще целый ряд лимфокинов, классифицировать которые пока невозможно.
Медиаторы, действующие на фагоцитоз. Факторы хемотаксиса. Исследования в камере Boyden показали, что под влиянием антигена из сенсибилизированных лимфоцитов выделяется фактор, оказывающий хемотаксическое действие на мононуклеарные клетки. Он инактивируется при нагревании, чувствителен к действию химотрипсина и не идентичен ФУМ. Это вещество выявляют при использовании лейкоцитарной массы в реакции торможения миграции лейкоцитов. Стимулированные лимфоциты выделяют также факторы для всех трех типов гранулоцитов. Они не идентичны факторам, действующим на макрофаги, а их относительная молекулярная масса составляет 24-55 К. На эозинофилы влияют два различных фактора; один из них, вероятно, в сочетании с иммунным комплексом. Фактор, воздействующий на базофилы, играет важную роль в реакции Джонса-Мота (кожная базофильная аллергия).
Фактор, угнетающий миграцию макрофагов (ФУМ, MIF). Данный фактор еще не точно идентифицирован по химическому составу. Его синтез начинается примерно через 6-8 ч после контакта с антигеном и продолжается в течение 4 последующих дней. Блокада синтеза белка, например пуро- или митомицином, подавляет синтез ФУМ. Химотрипсин и нейраминидаза подавляют его активность. Фактор не диализуется, термолабилен (30 мин при 56 °С) и резистентен к действию РНКазы и ДНКазы. Его относительная молекулярная масса составляет 25 К. Вероятно, речь идет о кислом гликопротеине с небольшим количеством сиаловой кислоты. Расчеты показали, что ФУМ, секретируемый сенсибилизированными при контакте с антигеном лимфоцитами, может угнетать миграцию нескольких тысяч макрофагов. Его действие преходяще - уже через 36-48 ч миграция может возобновляться. Вероятно, уменьшается поверхностный потенциал и изменяется проницаемость мембраны. Для реализации действия ФУМ большое значение, по-видимому, имеет L-фукоза клеточной мембраны. Ограничение действия ФУМ происходит под влиянием клеточной эстеразы. Для диагностики в тесте in vitro можно определять изменение миграции макрофагов, т. е. способность к расселению на поверхности (стекле, пластике).
Действие ФУМ важно для скопления макрофагов в очаге аллергической реакции. Хемотаксически вовлеченные клетки иммобилизуются и захватываются как бы на «клейкую ленту». Замедленное протекание аллергической реакции можно было бы объяснить тем, что сначала постепенно накапливаются сенсибилизированные лимфоциты, которые синтезируют ФУМ, а затем этот фактор оказывает влияние на макрофаги. При местном введении сначала наблюдают мононуклеарную инфильтрацию (через 4 ч). Позднее обнаруживают и полиморфно-ядерные гранулоциты. При более высоких концентрациях рассматриваемого фактора развивается некроз. Антигензависимая активность ФУМ пока изучена мало.
Фактор, замедляющий движение макрофагов. Фактор секретируется уже через 1-4 ч после контакта с антигеном, он снижает скорость перемещения макрофагов в электрическом поле (определение с помощью МЕМ-теста).
Существование независимого от ФУМ фактора агрегации макрофагов до настоящего времени не подтверждено. У человека удалось выявить фактор, угнетающий миграцию лейкоцитов (ФУЛ, LIF), с мол. м. 69 К, который не оказывает влияния на макрофаги. ФУЛ не диализуется и устойчив к нагреванию. Возможно, что в данном случае речь идет о протеазе. Т-клетки, по-видимому, секретируют преимущественно ФУЛ, а В-клетки - ФУМ.
Фактор исчезновения макрофагов. После парентерального введения антигена этот фактор вызывает адгезию макрофагов на стенках брюшной полости, причем в экссудате макрофаги не обнаруживаются. Данный фактор либо близок к ФУМ, либо идентичен ему.
Фактор, активирующий макрофаги, способствует активации макрофагов (моноцитов) с увеличением их размеров, повышением интенсивности обмена веществ и пиноцитоза, утратой базофилии. Имеются сообщения и о факторе резистентности макрофагов к действию бактерий и вирусов. Он изучен недостаточно. И, наконец, можно повысить уровень защитного иммунитета за счет цитофильных антител. Активированные макрофаги играют важную роль в иммунном ответе, опосредованном Т-клетками. При активации в макрофагах появляется и увеличивается число внутриклеточных гранул, начинается синтез и секреция нейтральных протеаз, появляется способность к адгезии на клетках эндотелия, начинается секреция активатора плазминогена. Результатом активации макрофагов может быть значительное повреждение тканей.
Медиаторы, действующие на клетки-мишени. Супернатанты культур лимфоцитов индуцированных антигеном, оказывают выраженное цитотоксическое действие на другие культуры. За этот эффект отвечают различные медиаторы.
I. Лимфоцитотоксины. В разных лабораториях из малых лимфоцитов были выделены растворимые цитотоксины. Несмотря на их гетерогенность, отмечены общие свойства. Они вырабатываются не только в ответ на контакт со специфическим антигеном, но и при неспецифических стимулах, например под влиянием митогенов. Их цитотоксическое действие направлено на различные клетки-мишени. Лучше всего изучен цитотоксин, описанный Granger. Его продукция идет параллельно синтезу РНК, синтезу белка и активности обмена веществ. С интенсивностью синтеза ДНК и митотическим индексом взаимосвязи не установлено. Выработка этого токсина подавляется гидрокортизоном, пуромицином и другими ингибиторами обмена веществ.
Лимфоцитотоксины вырабатываются, вероятно, только Т-клетками. Фракционирование с хроматографией позволило выделить а- и b-лимфоцитотоксины (отн. мол. м. 45 К). Их можно обнаружить уже через 6 ч. Однако до 20-го часа преобладает 6-, через 3-5 дней - а-лимфотоксин, который значительно стабильней. При действии на клетки-мишени различают два типа цитолиза. В одном случае клетка набухает, обычно после 1-2-часового воздействия. В другом случае через 3-5 мин клетка сжимается, что сопровождается интенсивным изменением ее содержимого. В клетках, вырабатывающих лимфоцитотоксины, важную роль играют механизмы синтеза и секреции. Возможно, в процессе продукции этих факторов активируется серинэстераза. К синтезу ДНК, напротив, эти события отношения не имеют.
Цитотоксический эффект можно обнаружить следующим образом:
- с помощью подсчета жизнеспособных лимфоцитов в культуре клеток-мишеней;
- путем учета выхода изотопов из разрушенных клеток в культуральную среду. Связанный с мембраной 51Сг менее пригоден.
b-Лимфоцитотоксин является ответственным в первую очередь за цитотоксичные эффекты, а а-, вероятно, тесно связан с неспецифическим супрессорным фактором.
II. Цитотоксические факторы. В отличие от лимфоцитотоксинов они секретируются другими мононуклеарными клетками. ЦТФ могут вырабатываться также малыми лимфоцитами. Если крупные активированные клетки секретируют фактор уже через 3 ч, то для покоящихся лимфоцитов необходимо 48-72 ч. Выделяемый крупными мононуклеарными клетками ЦТФ стабилен к нагреванию, его относительная молекулярная масса составляет около 1000 К. Химическая природа этого соединения пока не известна, речь идет скорее всего о фосфолипиде. Его цитотоксическое действие зависит от температуры.
В этих лимфотоксинах длительное время видели биохимическую основу Т-клеточной цитотоксичности. Новые экспериментальные данные показали отсутствие убедительной корреляции между продукцией этих медиаторов и цитотоксический эффектом. Антисыворотки к лимфотоксинам незначительно влияют на клеточную цитотоксичность. Таким образом, в патогенетическом плане на первый план выходят мембранные эффекты. Тем не менее эти факторы могут участвовать в повреждении тканей, обусловленном Т-клеточными реакциями.
Фактор, ингибирующий пролиферацию, и фактор, ингибирующий клонирование. Стимулированные антигеном, сенсибилизированные лимфоциты выделяют растворимое вещество, ингибирующее клеточное деление. Оно термостабильно, разрушается под влиянием трипсина; его действие видоспецифично. In vivo этот фактор имеет особое значение для предотвращения злокачественного роста. CIF подавляет клональный рост клеточных культур. Он не диализуется и отличается от PIF своей термолабильностью. Вероятно, оба эффекта опосредованы лимфоцитотоксинами.
III. Прочие медиаторы. Диализуемый экстракт лейкоцитов называют также фактором переноса (ФП). Он содержит смесь низкомолекулярных соединений (2-6 К). Надежды использовать ФП для бесклеточного переноса специфических иммунных реакций до настоящего времени не оправдались: на первом плане стоят эффекты активации и стимуляции дифференцировки лимфоцитов. Их значение для реакции типа IV пока неясно.
Кожно-реактивный фактор. Секреция этого фактора может быть вызвана как антигеном, так и неспецифическими стимуляторами (митогенами). Фактор выявляют через 8 ч в супернатанте стимулированных культур лимфоцитов, его молярная масса около 70 К. Продукция кожно-реактивного фактора подавляется ингибиторами синтеза белка и ДНК-зависимого синтеза РНК. При 56 °С фактор инактивируется частично, а при 100°С полностью. Он чувствителен к действию протеолитических ферментов, особенно пепсина. При электрофорезе фактор мигрирует в зону преальбумина и альбумина. Внутрикожная инъекция приводит к воспалительной реакции через 3-5 ч с максимумом через 8-12 ч. Гистологическая картина воспаления соответствует клеточному типу иммунной реакции. Возможно, что описанный феномен является результатом действия не одного, а целого ряда описанных выше медиаторов. С активностью кинина может быть связано изменение проницаемости сосудов. Кортизон подавляет кожную реакцию, однако не влияет на секрецию самого фактора.
Фактор проницаемости лимфоузлов впервые был обнаружен после ультразвукового разрушения клеток лимфатических узлов. Позже было показано, что он секретируется при аллергических реакциях Т-клеточного типа (туберкулиновой реакции, контактной сенсибилизации, ревматоидном артрите и тиреоидите). Он неустойчив к нагреванию, но устойчив к действию протеолитических ферментов.
Фактор активации остеокластов (ФАО) был обнаружен в многодневной культуре клеток. Его мол. м. лежит в пределах 13-25 К. ФАО устойчив к нагреванию и инактивируется протеолитическими ферментами. Активность медиатора определяется по освобождению 45Са из костной ткани. ФАО играет определенную роль при ревматоидном артрите, а также, возможно, при кариесе.
Фактор активации прокоагуляции (тканевый фактор) нормализует время свертывания плазмы, дефицитной по фактору VIII, однако неидентичен ему, из-за высокой лабильности до настоящего времени не охарактеризован, однако с его помощью можно объяснить ряд случаев частично выраженного отложения фибрина.
Колониестимулирующий фактор индуцирует дифференцировку стволовых клеток костного мозга в гранулоциты и моноциты. Фактор был выявлен после длительной стимуляции клеток митогеном и представляет собой термостабильный гликопротеин с мол. м. 40- 60К.
Приведенный перечень ни в коем случае не может считаться исчерпывающим. Использование новых методов, несомненно, приведет к выявлению неизвестных ранее активных факторов. С другой стороны, в настоящее время отсутствуют строгие доказательства того, что наблюдаемые эффекты обусловлены различными медиаторами. Совершенствование наших знаний может привести к сокращению числа известных лимфокинов.
Медиаторы могут секретироваться как Т-, так и В-клетками, хотя и существуют определенные различия. Лимфотоксины, митогенные факторы и колониестимулирующий фактор вырабатываются Т-клетками, ФУМ, ФУЛ, хемотактические факторы и интерферон могут секретироваться как Т-, так и В-клетками.
Активность лимфокинов in vivo. Большинство лимфокинов обнаруживается в супернатанте культур лимфоцитов, активированных антигеном. Их секреция in vivo возможна, но наблюдается не во всех случаях. Это справедливо, например, для кожно-реактивного фактора или фактора «исчезновения» макрофагов. ФУМ обнаруживают в сыворотке после воздействия клеток с антигеном, в синовиальной жидкости присутствуют ФУМ, ФУЛ. В афферентной лимфе регионарных лимфатических узлов после стимуляции можно выявить ФУМ (MIF) и митогенную активность, что связано с повышенной скоростью протекания жидкости через эти органы и с усиленным «вымыванием» лимфоцитов. Повышенная концентрация ФУМ в сыворотке была обнаружена как при В-, так и при Т-клеточной пролиферациях (плазмоцитома, синдром Сезари, болезнь Ходжкина, саркоидоз). Убедительным доказательством значения лимфокинов in vivo является выраженная реакция при введении антисывороток к лимфокинам.
Инъекция преформированных медиаторов в афферентную лимфу может вызвать в лимфатических узлах такие же изменения, что и после взаимодействия с антигеном: увеличение массы, числа клеток, растяжение паракортикальной области, а также рост зародышевых центров. Лимфокины играют важную роль не только при местных аллергических реакциях, но и непосредственно в лимфатических узлах.
Т-клеточная цитотоксичность. Ранее уже отмечалось, что повреждение клеток может осуществляться самыми разными механизмами. В настоящем разделе представлены факты о механизмах клеточной цитотоксичности. Все они могут быть сведены к нескольким основным моделям, хотя in vivo существуют их комбинации. Оценка цитотоксичности может осуществляться микроскопически, с помощью цитрайферной съемки, по пролиферации клеток, высвобождению радиоактивной метки или выявлению изменений внутри клеточного обмена веществ. Цитотоксические Т-лимфоциты активируются путем связывания на клетке антигена в комплексе с продуктами МНС класса II через рецепторы Ti и CD 8. Однако существуют доказательства существования субпопуляций, для которых отсутствует рестрикция по продуктам МНС.
Цитотоксическое действие активированных макрофагов. С развитием клеточной сенсибилизации макрофаги приобретают специфические цитотоксические свойства, которые играют важную роль в противоинфекционном иммунитете. Механизм пока не известен. Посредством ФУМ, ФХ и других медиаторов можно вызывать неспецифическую активацию. Оба механизма обусловливают цитотоксичность in vitro, чему способствует обилие ферментов в этих клетках. Эксперименты свидетельствуют о большом значении данного эффекта in vivo (например, противоинфекционный или противоопухолевый иммунитет). Макрофаги несут рецепторы к определенным классам Ig (цитофильные антитела), вследствие чего проявляются их цитотоксичные свойства при гуморальном типе сенсибилизации.
В конечном счете создается довольно высокий потенциал цитотоксичности, который служит основой защитной функции организма против возбудителей заболеваний или аномальных клеток. В первую очередь речь идет о проявлении специфической цитотоксичности Т-клеток-эффекторов и воздействии специфически «армированных» макрофагов. При этом играют роль и неспецифические механизмы, действующие через лимфокины или активированные макрофаги.
Возможность переноса состояния сенсибилизации. В отличие от гуморальной сенсибилизации перенос клеточного иммунитета возможен только с помощью жизнеспособных и обладающих функциональной активностью Т-клеток. Особое место занимает фактор переноса. Важную роль играют реакции организма, опосредованные лимфокинами. Все эти предпосылки создают условия для адаптивного переноса иммунитета.
Читать далее Проявления аллергической реакции клеточного типа